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大鼠胚胎干細胞

產品簡介

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產品廠地:上海市
更新時間:2025-02-17
廠商性質:經銷商
訪問量:496
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品牌其他品牌貨號GOY-01X1421
規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

產品屬性: 

產品名稱

規格

貨號

大鼠胚胎干細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

GOY-01X1421

商品介紹:

名稱    大鼠胚胎干細胞 

2.組織來源:囊胚

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠胚胎干細胞分離自囊胚胚胎組織;胚胎干細胞(Embryonic stem cellESCs,簡稱ESEKESC細胞)是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來的一類細胞,它具有體外培養無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內環境,ES細胞都能被誘導分化為機體幾乎所有的細胞類型。進一步說,胚胎干細胞(ES細胞)是一種高度未分化細胞。它具有發育的全能性,能分化出成體動物的所有組織和器官,包括生殖細胞。ES細胞具有與早期胚胎細胞相似的形態結構,細胞核大,有一個或幾個核仁,胞核中多為常染色質,胞質胞漿少,結構簡單。體外培養時,細胞排列緊密,呈集落狀生長。用堿性磷酸酶染色,ES細胞呈棕紅色,而周圍的成纖維細胞呈淡黃色。細胞克隆和周圍存在明顯界限,形成的克隆細胞彼此界限不清,細胞表面有折光較強的脂狀小滴。細胞克隆形態多樣,多數呈島狀或巢狀。小鼠ES細胞的直徑7 微米~18 微米,豬、牛、羊ES細胞的顏色較深,直徑12 微米~18 微米。胚胎干細胞與普通細胞有顯著差別,有其特定的生長特性和特定的標志,例如堿性磷酸酶活性非常高,帶有胚胎階段特異性表面抗原( Stage- specific embryonic antigens,SSEA),人類胚胎干細胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60TRA-1-81等標志,這些特性和標志均可以用于對胚胎干細胞進行鑒定,除此之外,胚胎干細胞還可以在體外傳代,并保持正常核型。在體外培養體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子( Leukaemia inhibitory factor,LF)或者在小鼠胚胎成纖維細胞飼養層(MEF)上培養時,胚胎干細胞都能呈克隆性增殖,長期保持核型正常和穩定,凍存解凍也不影響不分化的特性。另外,胚胎干細胞還表現岀高水平端粒酶活性,目前證明端粒酶與細胞衰老密切相關,多數成熟細胞的端粒酶活性都很低。這些都是胚胎干細胞與成熟細胞不同的重要特點,也可能是其復制生命期限遠比體細胞長的原因。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠胚胎干細胞采用分離囊胚組織,去除胚胎透明帶、使用特制專用培養基篩選培養,胰酶消化傳代純化制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的大鼠胚胎干細胞Oct-4免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件明膠(0.1%

培養基含LIFBMPPenicillinStreptomycin

產品貨號CM-R320

換液頻率每2-3天換液一次;

生長特性貼壁

細胞形態短梭形、多角形

傳代特性可傳5-8代左右

消化液0.025%胰蛋白酶

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 XPNPEP2 / X-Pro aminopeptidase 2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 IGFBP6 / IBP-6 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 IGFBP6 / IBP-6 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 PRSS27 / Pancreasin / Marapsin 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 CD4 / LEU3 (aa 1-208) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 RSPO3 / R-spondin 3 (aa 1-146) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 FGFR4 / FGF Receptor 4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 IL12A & IL12B Heterodimer 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 FLT1 / VEGFR1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 SerpinA6 / CBG 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠胚胎干細胞ATPIF1蛋白抗體Human LEFTY2 ELISA Kit小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒,

Attractin蛋白抗體Human LEF1 ELISA Kit小鼠α2抗纖溶(α2-AP)ELISA試劑盒,

化有絲分裂激B抗體Human LCTL ELISA Kit白活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒--動物,人

肌動蛋白相關蛋白M1抗體Human LDB1 ELISA KitⅠ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒--動物,人

ALKB蛋白抗體Human LDB3 ELISA Kit包蟲抗體IgG ELISA試劑盒--動物,人

乙酰輔A酰基轉移1抗體Human LDHAL6A ELISA Kit降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒--動物,人

β-肌動蛋白抗體Human LAX1 ELISA Kit促甲狀腺素釋放(TRH)ELISA試劑盒--動物,人

化素能受體β2/β2-AR 抗體Human LATS2 ELISA Kit兔血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒,

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