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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞細(xì)胞系L6565 (小鼠白血病克隆細(xì)胞系)
L6565 (小鼠白血病克隆細(xì)胞系)

產(chǎn)品簡介

L6565 (小鼠白血病克隆細(xì)胞系)的相關(guān)*:植物細(xì)胞周期S期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒 10次
植物細(xì)胞周期S后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒 10次
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植物細(xì)胞周期M期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒 10次
通用型植物樣品細(xì)胞周期G1/S和G2/M期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒 10次

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時(shí)間:2025-02-24
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:365
詳細(xì)介紹在線留言
品牌其他品牌貨號GOY-01X0261
規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

L6565 (小鼠白血病克隆細(xì)胞系)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0261

商品介紹:

名稱    L6565 (小鼠白血病克隆細(xì)胞系) 

種屬小鼠

年齡(性別)不詳

組織來源未知

生長特性懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)淋巴母細(xì)胞樣

背景描述L6565細(xì)胞源自L6565白血病小鼠的脾細(xì)胞懸液。L6565細(xì)胞染色體數(shù)從38-144不等;電鏡觀察證明,L6565細(xì)胞核邊界清晰,細(xì)胞質(zhì)中OragnallesA類、C類病毒顆粒豐富,細(xì)胞c-mycc-fos過量表達(dá)。L6565細(xì)胞克隆是一株含有RNA病毒的淋巴細(xì)胞白血病干細(xì)胞。

生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

注意事項(xiàng)該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請注意離心收集細(xì)胞懸液;請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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L6565 (小鼠白血病克隆細(xì)胞系)200mL 乙烯乙二醇 Ethylene Glycol -20℃保存

2 ug YEP352 YEP352 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

10g 酸洗玻璃珠(直徑:400μm)  常溫

2 ug pAcGP67A pAcGP67A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

胰蛋白胨大豆肉湯TSB(1kg)  1kg

1瓶 BGC-823細(xì)胞株 BGC-823 低溫運(yùn)輸和保存

乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基 Lactobacillus Agar Medium 250g

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