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產品中心

當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞大鼠精原干細胞
大鼠精原干細胞

產品簡介

大鼠精原干細胞的相關*:細蛋白(PROTEASE)活性熒光定量檢測試劑盒 20次
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產品廠地:上海市
更新時間:2025-02-26
廠商性質:經銷商
訪問量:463
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品牌其他品牌貨號GOY-01X1203
規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產品屬性:  

產品名稱

規格

貨號

大鼠精原干細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

GOY-01X1203

商品介紹:

名稱    大鼠精原干細胞  

2.組織來源:睪丸組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠精原干細胞分離自睪丸組織;精原干細胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內的一群生精干細胞,是成體內的定向干細胞。精原干細胞的一些*優勢使其成為動物轉基因的理想宿主細胞。精原干細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調節機制的深入研究,發生機理的進一步闡明以及精原干細胞轉染,異體、異種移植技術的實際應用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產量和純度的有活力的精原細胞用于體外培養。在哺乳動睪丸內,發生時一個受高度調控和持續的過程,精原干細胞(SSCs)一方面進行自我更新維持干細胞數量,另一方面又不斷執行分化成各級生精細胞直至最后生成。精原干細胞定居在曲精細管上皮的基膜處,是哺乳動物發生的最原始細胞,也是動物體內一起能將遺傳信息傳遞的干細胞。精原干細胞體外培養體系的建立,在生物學、醫學、畜牧業及制備轉基因動物等領域具有廣闊的應用前景。精原干細胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動物體內能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細胞。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠精原干細胞采用先機械吹打、后胰蛋白酶消化,結合Percoll密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的大鼠精原干細胞CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產品貨號CM-R171

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性懸浮

細胞形態球形

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 uPAR 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

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小鼠 NCSTN 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

大鼠精原干細胞D-乙酯鹽酸鹽 BR(3-氯基)氧基硅烷 98%BetaGAL(Human Alpha-galactosidase) ELISA Kit  人β半乳糖苷

L-天門冬-β-芐酯  98%3-氯基二甲氧基硅烷 97%IDUA(Human Alpha-L-iduronidase) ELISA Kit  人αL艾杜糖苷酸

N-乙酰-D-谷 BRγ-縮水甘油氧基氧基硅烷 97%Alpha2-AP(Human Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit  人α2抗纖溶

N-乙酰-L-蛋 98.5%三乙氧基硅烷 97%NAG(Human N-acetyl- Beta-D-glucosaminidase) ELISA Kit  人N-乙酰-β-D-葡萄糖苷

N-乙酰-D- BR甲基三乙氧基硅烷 98%PAL(Human L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit  人L苯解氨

BOC-O-芐基-L- 98%甲基氧基硅烷 98%5-NT(Human 5-Nucleotidase) ELISA Kit  人5核苷酸

叔丁氧羰基-L-賴  98%氧硅烷 95%1,3- BetaD-Glu(Human 1,3- BetaD glucosidase) ELISA Kit  人1,3-βD葡葡糖苷

BOC-甘 99%黃原膠 USP級CK(Human Creatine Kinase) ELISA Kit  人肌酸激

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